快速限制性內(nèi)切酶質量控制

快速限制性內(nèi)切酶質量控制

產(chǎn)品描述

FuniCut™系列內(nèi)切酶是通過基因工程重組技術，可在5~15 min內(nèi)精確完成DNA切割的快速限制性內(nèi)切酶，適用于快速切割質粒DNA、PCR產(chǎn)物、基因組DNA等。FuniCut™系列快速內(nèi)切酶共用一種酶切緩沖液，從而簡化了酶切反應體系，另外，有良好的酶活冗余度，可輕松處理底物過量或困難模板的酶切。

識別位置

5'-↓GATC-3'

3'-CTAG↑-5'

推薦反應條件

1× FuniCut™ 緩沖液；

最適37°C孵育。

失活條件

80°C孵育20 min。

注意事項

1）3 h孵育未表現(xiàn)星號活性，延時酶切可能出現(xiàn)星號活性；

2）受Dam甲基化影響，序列完-全重疊，剪切阻斷；

3）受EcoBI甲基化影響，序列可能重疊，剪切阻斷；

4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作；

5）本產(chǎn)品僅作科研用途！

質量控制

1. 功能活性檢測：最適反應溫度下，在20 μL反應體系中，1 μL酶能夠在15 min內(nèi)完-全消化1 μg λDNA (Dam-)。

2. 超長時間孵育檢測：最適反應溫度下，將1 μL酶與1 μg λDNA (Dam-)共孵育3 h，未檢測到其他核酸酶污染或星號活性引起的底物非特異性降解，但延長孵育時間可能出現(xiàn)星號活性。

3. 酶切-連接-再酶切檢測：最適反應溫度下，使用1 μL酶消化底物，回收酶切產(chǎn)物，在22°C下使用適量T4 DNA連接酶可以將酶切產(chǎn)物重新連接，將連接產(chǎn)物再次回收后，使用相同的內(nèi)切酶可以重新切開連接產(chǎn)物。

4. 非特異性內(nèi)切酶活性檢測：最適反應溫度下，將1 μL酶與1 μg超螺旋質粒DNA共同孵育4 h后，使用瓊脂糖凝膠電泳檢測，質粒DNA仍然處于超螺旋狀態(tài)。