無(wú)機(jī)磷檢測(cè)試劑盒(紫外比色法) 產(chǎn)品說(shuō)明

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

血清中的無(wú)機(jī)磷(lnorganic phosphorous)主要由 H2PO 和HPO: 兩種磷酸根陰離子組成，上述陰離子在在不同的 pH 環(huán)境下能快速相互轉(zhuǎn)換，在 pH7.4 血清中兩種磷酸根陰離子濃度比例為 1:4;在酸中毒環(huán)境下二者濃度約為 1:1;在堿中毒環(huán)境下二者濃度比例為1:9;在 pH4.5 尿液中濃度比例為 100:1。WHO 推薦的常規(guī)檢測(cè)方法為比色法，我國(guó)衛(wèi)生部臨檢中心推薦的常規(guī)方法為硫-酸-亞-鐵鉬藍(lán)比色法和米吐?tīng)栥f藍(lán)比色法,亦可采用紫外分光光度法。無(wú)機(jī)磷檢測(cè)試劑盒(紫外比色法)無(wú)需處理樣本,利用無(wú)機(jī)磷與鉬酸銨結(jié)合生成磷鉬酸銨，通過(guò)紫外分光光度計(jì)檢測(cè) 325~340nm 處吸光度,根據(jù)公式計(jì)算出無(wú)機(jī)磷含量該紫外法優(yōu)點(diǎn)在于:操作簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定;缺點(diǎn)在于:易受溶血、黃疽、脂血的干擾。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

操作步驟(僅供參考):

(選做)制備樣品:

1、①血漿、血清樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,可以直接用于本試劑盒的測(cè)定，-20℃凍存，用于 Pi的檢測(cè)。

②細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行勻漿，低速離心取上清，-20℃凍存，用于Pi 的檢測(cè)。

③高濃度樣品:如果樣品中含有較高濃度的 Pi，可以使用 ddH,0 稀釋?zhuān)灰耸褂闷胀ㄕ麴s水稀釋。

④(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用 BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度，以便于后續(xù)計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的 Pi 含量。

2、制備磷標(biāo)準(zhǔn)工作液:取適量的磷標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)，按磷標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml):磷標(biāo)準(zhǔn)稀釋液=1:39 的比例稀釋?zhuān)传@得磷標(biāo)準(zhǔn)工作液(25 μg/ml=0.807 mmol/L)，4℃保存，用于 Pi的檢測(cè)。

3、制備鉬酸銨顯色液:稱(chēng)取適量的鉬酸銨粉末，按照鉬酸銨粉末:鉬酸銨稀釋液(2x):去離子水=12mg:10m1:10ml的比例混合溶解，即可使用。亦可稱(chēng)取 120mg 鉬酸銨粉末加入 100ml去離子水，充分溶解后分裝成 10ml或適當(dāng)規(guī)格的小份，使用時(shí)與鉬酸銨稀釋液(2x)等比例混合即可使用，-20℃保存，可適當(dāng)延長(zhǎng)保質(zhì)期。鉬酸銨顯色液配制后可 4℃保存2周，如溶液變渾濁或顏色加深則應(yīng)棄用。請(qǐng)注意，本產(chǎn)品提供多于實(shí)際用量的鉬酸銨粉末。

4、Pi 加樣:按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并注意避免產(chǎn)生氣泡，小心混勻。如果樣品中的無(wú)機(jī)磷濃度過(guò)高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置2平行管，求平均值。

5、Pi 檢測(cè):混勻，室溫靜置 5min，比色杯光徑 1cm，分光光度計(jì) 340nm 處檢測(cè)，以空白管調(diào)零，讀取標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管的吸光度(即為 A標(biāo)準(zhǔn)，A測(cè)定)。

有效期: 12 個(gè)月有效。常溫運(yùn)輸，按要求保存。

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