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測定意義：

無機磷主要指磷酸根，參與生物體內(nèi)多種代謝，包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質(zhì)磷酸化和脫磷酸化等等，此外促進碳水化合物的合成、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)運。

測定原理：

鉬藍與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質(zhì)，通過測定660nm光吸收，即可計算無機磷含量。

實驗中所需儀器及設(shè)備：

可見分光光度計、離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配置：

試劑一：液體×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體×1瓶，4℃保存。

試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前配制，加入20 mL蒸餾水，充分溶解后加入試劑二（全部），混勻。

標準品：液體×1支，2 μ mol/L無機磷標準液，4℃保存。

無機磷提?。?/span>

  稱取約0.1g組織，加試劑一1.0 mL冰上充分勻漿，4℃，10000rpm，離心10min，取上清液，待測。

無機磷磷含量測定操作：

1. 分光光度計預熱30 min以上，調(diào)節(jié)波長到660 nm，蒸餾水調(diào)零。

2.打開水浴鍋，調(diào)節(jié)溫度到40℃。

3. 空白管：取EP管，依次加入500μL蒸餾水，500μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度，記為A空白管。

4. 標準管：取EP管，依次加入50μL標準液，450μL蒸餾水，500μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度，記為A標準管。

5. 測定管：取EP管，依次加入50μL上清液，450μL蒸餾水，500μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度，記為A測定管。

需在40min內(nèi)完成比色。

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