雞紅細(xì)胞的制備方法您知道嗎？

01、心臟采血  

雞右側(cè)臥自然保定，從膝關(guān)節(jié)稍前下方處垂直地面進(jìn)針采血。

要點(diǎn)：

（1）采血前雞盡可能處于自然狀態(tài)。

（2）垂直地面進(jìn)針：刺入正確時(shí)，松開(kāi)注射器，會(huì)看到注射器隨心臟的自然跳動(dòng)。

（3）先把針全部刺入，如采不出，可以一邊向上提注射器，一邊采血，注意向上提注射器時(shí)速度要慢。

02、翅靜脈采血   

（1）捏住近心端，讓翅靜脈臌起。

（2）針頭斜面向上，小角度刺入翅靜脈中，待出現(xiàn)回血時(shí)，松開(kāi)近心端，固定好針頭進(jìn)行采血即可。

雞紅細(xì)胞如何制備？

以1%雞紅細(xì)胞為例

把采集過(guò)動(dòng)物血液的采血管依次放入卡套內(nèi)，并將放置于離心機(jī)對(duì)角線的兩個(gè)卡套配平，使其重量相同(相差不超過(guò)0.2g)，低溫離心機(jī)4000r/min，離心10分鐘。離心機(jī)的使用參照離心機(jī)的操作規(guī)程。

1、清洗紅細(xì)胞

1.1于超凈臺(tái)內(nèi)采集上清液置于無(wú)菌血清瓶中即為血漿（不同的抗凝劑需做好標(biāo)記），-20℃冷凍保存于固定區(qū)域

1.2小心吸取紅細(xì)胞上方的白細(xì)胞層，并棄去。

1.3在每根吸除過(guò)白細(xì)胞的采血管中，加入和壓積紅細(xì)胞等體積的無(wú)菌1×PBS，并輕輕吹打混勻。

1.4將混勻好的紅細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)至15ml無(wú)菌離心管中，低溫離心機(jī)2000r/min離心10分鐘。

1.5吸取上清液并棄去。

1.6   加入和壓積紅細(xì)胞等體積的無(wú)菌1×PBS，并輕輕吹打混勻。低溫離心機(jī)2000r/min離心10分鐘。重復(fù)1.5-1.6步驟一次，吸取上清液并棄去即為紅細(xì)胞原液。

2、制作紅細(xì)胞懸液根據(jù)所需的紅細(xì)胞百分比濃度，在血清瓶中加適量2-8℃保存的阿氏液和紅細(xì)胞原液，制成1%的雞紅細(xì)胞懸液。

保存方法

（1%雞紅細(xì)胞保存條件：2-8℃，30天）

注意事項(xiàng)：

·         注意不要凍融

·         每天需上下輕輕顛倒混勻

·         注意無(wú)菌操作

·         2-8℃保存，盡快使用

·         盡量避免劇烈震蕩