谷氨酸（Glu）含量檢測試劑盒

標(biāo)題：谷氨酸（Glu）含量檢測試劑盒

產(chǎn)品概述

谷氨酸(Glu)含量檢測試劑盒

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。

試劑的組成和配制：

試劑一：液體50mL×2瓶，4℃保存；

試劑二：粉劑×2瓶， 4℃保存；臨用前每瓶加入5mL雙蒸水，用不完的試劑仍 4℃保存。

谷氨酸提取：

細菌、細胞或組織樣品

收集細胞或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每1000萬細菌或細胞加入2mL試劑一，超聲波破碎細菌或細胞（功率20％，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）， 8000g，常溫離心10min，取上清待測。

稱取約0.2g組織，加入2mL試劑一進行冰浴勻漿， 8000g，常溫離心10min，取上清待測。

測定步驟

1. 分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至570nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 在有蓋EP管中加入下列試劑：

混勻，90℃水浴20min（蓋緊，以防止水分散失），流水冷卻，于570nm波長處比色，△A=A測定管-A對照管。對照管只要做一管。

注意事項：

為提高檢測靈敏度，測定管的吸光值應(yīng)小于1，若大于1則需要將上清液用試劑一稀釋至適當(dāng)倍數(shù)后測定。

谷氨酸含量計算：

1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 0.0328x- 2.423； x為谷氨酸含量（µg/mL），y為吸光值。

2、按照蛋白濃度計算

谷氨酸含量（µg/mg）=(△A +2.423)÷0.0328÷Cpr=30.49×(△A+2.423) ÷Cpr

3、按照樣品質(zhì)量計算

谷氨酸含量（µg/g鮮重）=(△A +2.423)÷0.0328÷(W÷V樣總）=60.98×(△A+2.423) ÷W

4、按照細菌或細胞密度計算

谷氨酸含量（μg/10⁴ cell）＝(△A +2.423)÷0.0328÷（1000÷V樣總）=0.061×(△A+2.423)

V樣總：加入提取液體積，2mL； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g；1000：細菌或細胞總數(shù)，1000萬。

注意：該試劑盒僅適用于發(fā)酵液或組織中谷氨酸含量測定，檢測下限為70µg/mL。

谷氨酸(Glu)含量檢測試劑盒