海藻糖含量檢測試劑盒

標(biāo)題：海藻糖含量檢測試劑盒

產(chǎn)品概述

海藻糖含量檢測試劑盒

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿﹑研缽、濃硫酸（不允許快遞）和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 50ml×1瓶，4℃保存；

試劑一：粉劑×5瓶，4℃保存；

工作液的配制：臨用前在每瓶試劑一中加入1.5mL蒸餾水后，緩慢加入8.5mL濃硫酸，不斷攪拌，充分溶解，待用。

海藻糖提取：

1、細(xì)菌或細(xì)胞處理：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每200萬細(xì)菌或細(xì)胞加入400μL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），室溫靜置45min，振蕩3~5次，冷卻后，8000g，常溫離心10min，取上清。

2、組織的處理：稱取約0.1g樣本，常溫研碎，加入1mL提取液，室溫靜置45min，振蕩3~5次，冷卻后，8000g，常溫離心10min，取上清。

3、血清（漿）的處理：吸取約100μL血清（漿），加入1mL提取液，室溫靜置45min，振蕩3~5次，冷卻后，8000g，常溫離心10min，取上清。

測定操作表（在1.5mLEP管中依次加入下列試劑）：

混勻，100'C煮沸10 min（蓋緊，防止水分散失），自然冷卻至室溫，在620 nm 波長下測定吸光度值。

注意：由于工作液具有強(qiáng)腐蝕性，請(qǐng)謹(jǐn)慎操作。

海藻糖含量計(jì)算：

標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 8.8976x +0.0729；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y為吸光值。

1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織海藻糖含量計(jì)算

（1）：海藻糖含量（mg/mg prot ）＝（A測定管-0.0729）÷8.8976 ÷蛋白濃度mg/mL。

（2）：海藻糖含量（mg/g 鮮重）＝（A測定管-0.0729）÷8.8976 ÷樣品鮮重g/mL。

2、血清（漿）海藻糖含量計(jì)算

海藻糖含量（mg/L）＝（A測定管-0.0729）÷88.976 

海藻糖含量檢測試劑盒