脯氨酸（PRO）含量檢測試劑盒

標題：脯氨酸（PRO）含量檢測試劑盒

產(chǎn)品概述

脯氨酸(PRO)含量檢測試劑盒

測定原理：

用磺基水楊酸（SA）提取Pro，加熱處理后，Pro與酸性茚三酮溶液反應(yīng)生成紅色；加甲苯萃取后，在520nm測定吸光度。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、冰乙酸50mL、甲苯100mL、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：冰乙酸25 mL×1瓶， 4℃保存。（自備）

試劑二：液體25 mL×1瓶， 4℃保存。

試劑三：甲苯50mL×1瓶，4℃保存。（自備）

樣品測定的準備：

1、細胞、細菌或組織樣品的制備 ：

細菌或細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，棄上清；按照每100萬細菌或細胞加入1mL提取液，超聲波破碎細菌或細胞（功率20％，超聲3秒，間隔10秒，重復(fù)30次），之后置沸水浴振蕩提取10min；10000g，常溫離心10min，取上清，冷卻后待測。

組織：稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進行冰浴勻漿；之后置沸水浴振蕩提取10min，10000g，常溫離心10min，取上清，冷卻后待測。

2、血清（漿）樣品：取100μL血清（漿）加入1mL提取液，充分混勻，之后置沸水浴振蕩提取10分鐘，10000g，常溫離心10分鐘，取上清，冷卻后待測。

測定步驟：

1、取0.5mL上清液+0.5mL試劑一+0.5mL試劑二 于有蓋試管中，置沸水浴中保溫30min（蓋緊，防止水分散失），每10min振蕩一次。

2、待冷卻后，在試管中加入1mL試劑三，振蕩30s，靜置片刻，使色素轉(zhuǎn)至試劑三中；吸取0.8mL-1mL上層溶液于1mL玻璃比色皿中，用試劑三調(diào)零，于520nm波長處比色，記錄吸光值。

脯氨酸(PRO)含量檢測試劑盒