乳酸脫氫酶（LDH）檢測試劑盒

描述：測定意義：
LDH（EC 1.1.1.27）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是糖酵解途徑的末端酶，催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應(yīng)，伴隨著NAD+/NADH之間互變。
測定原理：
LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸進(jìn)一步與2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在堿性溶液中顯棕紅色，顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。
乳酸脫氫酶（LDH）檢測試劑盒

產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
更新時間：2019-11-07
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產(chǎn)品詳情/ PRODUCT DETAIL

標(biāo)題：乳酸脫氫酶（LDH）檢測試劑盒

產(chǎn)品概述

乳酸脫氫酶(LDH)檢測試劑盒

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：30mL×1瓶， 4℃保存；

試劑一：液體15 mL×1瓶， 4℃保存；

試劑二：粉劑×1支，-20℃保存，用時加入1.3 mL雙蒸水充分溶解備用，配好后-20 ℃保存，可保存兩周，禁止反復(fù)凍融；

試劑三：液體15 mL×1瓶，4℃保存；

試劑四：液體50 mL×1瓶L，4℃保存；

樣品測定的準(zhǔn)備：

1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備：

細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，棄上清，按照每200萬細(xì)菌或細(xì)胞加入400μL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％，超聲3秒，間隔10秒，重復(fù)30次）。8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

組織：稱取約0.1g組織，加入1mL提取液或者生理鹽水進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

測定操作表（在1mL EP管中反應(yīng)）：

試劑名稱(μL)	測定管	對照管
待測樣本	50	50
試劑一	250	250
試劑二	50
蒸餾水		50

充分混勻，37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）水浴15min

試劑三

250

充分混勻，37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）水浴15min

試劑四

750

充分混勻，室溫靜置3分鐘，450 nm下測定吸光度

注意事項：

1、粗酶液的提取必須在0℃ - 4℃中操做完成，以防止酶變性失活。測定過程中樣本﹑試劑二和標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液必須在冰上放置。

3、由于每個樣本都要做測定管和對照管，因此本試劑盒50管可測24個樣本。

乳酸脫氫酶(LDH)檢測試劑盒

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