脫氫抗壞血酸還原酶（DHAR）活性檢測試劑盒

標(biāo)題：脫氫抗壞血酸還原酶（DHAR）活性檢測試劑盒

產(chǎn)品概述

脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性檢測試劑盒

測定原理：

DHAR催化GSH還原DHA生成AsA，通過測定DHA減少速率，計算DHAR活性。

實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備：

研缽、冰、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計/、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：液體50 mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體35 mL×1瓶，4℃保存。

試劑三：粉劑×1瓶（棕色），4℃保存。臨用前加入2.5 mL蒸餾水充分溶解。

試劑四：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入2.5 mL蒸餾水充分溶解。

粗酶液提取：

稱取約0.1g樣品，加試劑一1 mL，冰上充分研磨，16000g 4℃離心20min，取上清液待測。

DHAR測定操作：

1. 分光光度計預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到265nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二在25℃水浴鍋中預(yù)熱30 min以上。

3. 空白管：在微量石英比色皿/96孔板中依次加入20μL蒸餾水、20μL試劑三、20μL試劑四和140μL 試劑二，迅速混勻后于265nm比色，記錄30s和150s的吸光值。

4. 測定管：在微量石英比色皿/96孔板中依次加入20μL上清液、20μL試劑三、20μL試劑四和140μL 試劑二，迅速混勻后于265nm比色，記錄30s和150s的吸光值。

脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性檢測試劑盒