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中性木聚糖酶檢測(cè)試劑盒

描述:NEX在中性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,在沸水浴條件下進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng),在540nm處有特征吸收峰.
中性木聚糖酶檢測(cè)試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2019-11-07
  • 訪問(wèn)量:469
產(chǎn)品詳情/ PRODUCT DETAIL

標(biāo)題:中性木聚糖酶檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品概述

中性木聚糖酶檢測(cè)試劑盒

測(cè)定意義
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生,能催化水解木聚糖,也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶,可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖,降低釀造中物料的粘度,促進(jìn)有效物質(zhì)的釋放,以及降低飼料中的非淀粉多糖,促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用,因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中,NEX一般分離自適生長(zhǎng)pH為6-8的微生物。

測(cè)定原理

NEX在中性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,在沸水浴條件下進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng),在540nm處有特征吸收峰,反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比,通過(guò)測(cè)定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率,可計(jì)算NEX活力。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋,可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制

緩沖液:液體65mL×1瓶,4保存。

試劑一:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體15mL×1瓶,4避光保存。

粗酶提取

  1. 發(fā)酵液:發(fā)酵液于8000rpm4℃,離心15min,取上清,作為待測(cè)樣品。
  2. 酶干粉:稱約0.1mg,加提取液1mL,震蕩溶解待測(cè)。

測(cè)定操作表

 

對(duì)照管

測(cè)定管

樣品(μL

200

200

緩沖液(μL

300

300

試劑一(μL

 

200

試劑二(μL

300

 

混勻,蓋緊瓶蓋,50℃水浴,反應(yīng)30min,立即沸水浴10min滅活。(注意不要讓蓋子爆開,以免進(jìn)水,改變了反應(yīng)體系)

試劑一(μL

200

 

試劑二(μL

 

300

混勻,沸水浴顯色5min(注意不要讓蓋子爆開,以免進(jìn)水改變了反應(yīng)體系),1mL玻璃比色皿,對(duì)照管調(diào)零,測(cè)定A540。

注意事項(xiàng)

1. 吸光度變化應(yīng)該控制在0.01~0.8之間,否則加大樣品量或稀釋樣品,注意計(jì)算公式中參與計(jì)算的稀釋倍數(shù)要相應(yīng)改變;也可以延長(zhǎng)或者縮短反應(yīng)時(shí)間。

2. 試劑盒2-8℃保存,保質(zhì)期3個(gè)月,建議盡快使用。

中性木聚糖酶檢測(cè)試劑盒

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