谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）檢測(cè)試劑盒

標(biāo)題：谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品概述

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)檢測(cè)試劑盒

測(cè)定原理

GPT催化丙氨酸和α-酮戊二酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，生成丙酮酸和谷氨酸；加入2,4-二硝基苯肼溶液，不僅終止上述反應(yīng)，而且與酮酸中的羰基加成，生成丙酮酸苯腙；苯腙在堿性條件下呈紅棕色，可以在505nm讀取吸光值并計(jì)算酶活力。

試驗(yàn)中所需的儀器和用品

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制

提取液：30mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體10 mL×1瓶， 4℃保存；

試劑二：液體15 mL×1瓶， 4℃保存；

試劑三：液體50 mL×1瓶，4℃保存；

樣品測(cè)定的準(zhǔn)備

1、 細(xì)胞或微生物樣品的制備 ：

先收集細(xì)胞或微生物樣品到離心管內(nèi)，棄上清，按照每500萬細(xì)胞或微生物加入1mL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）。3500g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、組織：

稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進(jìn)冰浴行勻漿。3500g  4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

測(cè)定操作表：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至505nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 在EP管中加入下列試劑

 混勻后，37℃（哺乳動(dòng)物）或25℃（其它物種）預(yù)熱30min

混勻后，37℃（哺乳動(dòng)物）或25℃（其它物種）準(zhǔn)確水浴20min

混勻，室溫放置10min，在505nm波長(zhǎng)處，測(cè)各管吸光度。

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)檢測(cè)試劑盒