谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）檢測試劑盒

標(biāo)題：谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）檢測試劑盒

產(chǎn)品概述

谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)檢測試劑盒

測定原理

GOT催化 α-同戊二酸和天門冬氨酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，生成谷氨酸和草酰乙酸，草酰乙酸進(jìn)一步自行脫羧生成丙酮酸；丙酮酸可與2,4-二硝基苯肼反應(yīng)生成2,4-二硝基苯腙，在堿性條件下顯棕紅色；測定505nm吸光度的變化，即可計(jì)算GOT酶活力。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制

提取液：液體30mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體10 mL×1瓶， 4℃保存；

試劑二：液體15 mL×1瓶， 4℃保存；

試劑三：液體50 mL×1瓶，4℃保存；

樣品測定的準(zhǔn)備

1、 細(xì)胞或微生物樣品的制備 ：

先收集細(xì)胞或微生物樣品到離心管內(nèi)，棄上清，按照每500萬細(xì)胞或微生物加入1mL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）。3500g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、組織：

稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進(jìn)冰浴行勻漿。3500g  4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

3、血清（漿）樣品：直接檢測。

測定操作表

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至505nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 在EP管中加入下列試劑

混勻后，37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）預(yù)熱30min

混勻后，37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）準(zhǔn)確水浴20min

混勻，室溫放置10min，在505nm波長處，測各管吸光度。

谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)檢測試劑盒