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脂肪酸合成酶(FAS)檢測(cè)試劑盒

描述:測(cè)定意義:
FAS是脂肪酸合成關(guān)鍵酶,催化乙酰輔酶A和丙二酰輔酶A而生成長(zhǎng)鏈脂肪酸。FAS普遍表達(dá)于各種組織細(xì)胞中,在哺乳動(dòng)物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達(dá)豐富。
測(cè)定原理:
FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH生成長(zhǎng)鏈脂肪酸和NADP+;NADPH在340nm有吸收峰,而NADP+沒(méi)有;通過(guò)測(cè)定340nm 光吸收下降速率,計(jì)算FAS活性。
脂肪酸合成酶(FAS)檢測(cè)試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠(chǎng)商性質(zhì):生產(chǎn)廠(chǎng)家
  • 更新時(shí)間:2019-11-07
  • 訪(fǎng)問(wèn)量:382
產(chǎn)品詳情/ PRODUCT DETAIL

標(biāo)題:脂肪酸合成酶(FAS)檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品概述

脂肪酸合成酶(FAS)檢測(cè)試劑盒

自備儀器和用品:

研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,-20℃保存。用前1d取出置于4℃充分解凍后混勻。

試劑二:粉劑×1瓶。臨用前加入440μL試劑四,充分溶解。

試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入440μL試劑四,充分溶解。

試劑四:液體×1, 4℃保存。

試劑五:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入840μL試劑四,充分溶解。

粗酶液提取:

稱(chēng)取約0.1g樣品,加試劑一1 mL充分研磨,16000rpm 4℃離心40min,取上清液,待測(cè)。

FAS測(cè)定操作:

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑四置于40℃水浴中預(yù)熱30 min以上。

3. 空白管:500μL EP管中依次加入20μL蒸餾水、4μL試劑二、4μL試劑三、164μL試劑四和8μL試劑五,迅速混勻后于340nm處測(cè)定吸光值,記錄第30s90s時(shí)吸光值,分別記錄為A1A2。△A=A1-A2。

4. 測(cè)定管:500μL EP管中依次加入20μL上清液、4μL試劑二、4μL試劑三、164μL試劑四和8μL試劑五,迅速混勻后于340nm處測(cè)定吸光值,記錄第30s90s時(shí)吸光值,分別記錄為A1A2。△A測(cè)=A3-A4

注意事項(xiàng):

上清液蛋白質(zhì)濃度需要另外測(cè)定,建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒。

脂肪酸合成酶(FAS)檢測(cè)試劑盒

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